棉 花 学 报    Cotton Science    2008,20(2):94-98

 

 

陆地棉脱外壁花粉粒的制备和花粉粒核 DNA 检测
岳洁瑜1,吴李君2,吴跃进2,张宝龙3,唐灿明1*
(1.南京农业大学农学院,江苏 南京 210095;2.中国科学院等离子体物理研究所,安徽 合肥 230031;
3.江苏省农业科学院遗传生理研究所,江苏 南京 210014)

摘要:以陆地棉品种苏棉 22 号的花粉为材料,研究棉花花粉粒脱外壁和检测花粉粒内部核 DNA 状态的方法。花粉粒经 4% 多聚甲醛固定后,通过 10% 次氯酸钠水溶液氧化、55℃热激 30min、压片等系列程序可将花粉粒的外壁完全脱去,分离出完整的脱外壁花粉粒。用 DNA 荧光染料 DAPI 分别对陆地棉花粉粒和脱外壁花粉粒进行染色,在荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜下观察花粉粒的内部核结构。没有脱外壁的花粉粒的内部核结构难以被观察到,而脱外壁花粉粒的核 DNA 结构清晰可见,内壁几乎无荧光。首次发现陆地棉的成熟花粉粒为三核花粉粒。
关键词:陆地棉;花粉粒;脱外壁花粉粒;DAPI
中图分类号:S562.01     文献标识码:A
文章编号:1002-7807(2008)02-0094-05       [全文,1810KB、附图,1314KB]