棉 花 学 报 Cotton Science 2007,19(6):431-435
南瓜韧皮部特异性启动子在转基因棉花中的表达 摘要:以自行构建的重组南瓜韧皮部特异启动子 dENP 构建了植物表达载体 pBII2。利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens) LBA44O4 介导转化棉花 (Gossypium hirsutum L.) 品种珂字 312,共获得转 pBII2 和对照 pBI121 的抗卡那霉素棉花再生植株 243 株,筛选出 172 株为转基因阳性植株。 Southern blot 分析确证外源 Gus 基因插入拷贝数在 1 个或 2 个以上。对这些转基因棉花植株进行 Gus 染色结果表明 dENP 和 CaMV35S 启动子一样均能驱动 Gus 基因的表达,前者仅在棉花的韧皮部内特异表达,而 CaMV35S 启动子驱动的 Gus 基因为组成性表达。Gus 酶活力测定结果进一步表明 dENP 和 CaMV35S 启动子驱动 Gus 基因表达水平相当,但是转 pBII2 棉花植株的 Gus 富集在韧皮部组织。证明了 dENP 启动子驱动的外源基因在棉花中具有韧皮部特异而高效表达的特征,从而可用于棉花抗病、抗蚜虫转基因研究。
|