棉 花 学 报    Cotton Science   2010，22（3）：202-208

均匀设计优化棉花 ISSR-PCR 反应体系
朱岩芳¹，祝水金¹，王　洋¹, 李永平²，马文广², 胡　晋^1*
(1.浙江大学农业与生物技术学院种子科学中心，杭州 310029；2.中国烟草育种研究(南方)中心，云南 玉溪 653100)

摘要：为探索适宜棉花的 ISSR-PCR 反应体系，采用两轮均匀设计试验，对 ISSR-PCR 反应体系中 Mg²⁺、dNTPs、模板 DNA、引物、Taq DNA 聚合酶的浓度或用量进行优化。结果表明，棉花 20 μ L 的 ISSR 反应体系的最佳组分包括 2 μ L 10 × PCR Buffer、0.5 U Taq DNA 聚合酶、40 ng 模板 DNA、0.25 mmol·L^-1 dNTPs、0.5 μ mol·L^-1 引物和 2.0 mmol·L^-1 Mg²⁺。利用 8 个棉花品种和三条不同引物验证该反应体系，结果表明，该反应体系的稳定性和重复性较好。
关键词：棉花；ISSR；体系优化；均匀设计
中图分类号：S562.035.3       文献标识码：A
文章编号：1002-7807(2010)03-0202-07     [全文，468KB]