棉 花 学 报 Cotton Science 2010，22（2）：157-162
棉铃虫 HaHR3 基因的克隆及其植物 RNA 干扰载体的构建 摘要：采用 RT-PCR 方法克隆了棉铃虫蜕皮调节转录因子 HaHR 3 基因，该基因含有 1671 bp 的完整开放阅读框。序列分析表明，HaHR3 与多种昆虫蜕皮调节转录因子高度同源。利用生物信息学方法对 HaHR3 的结构特征进行分析发现，HaHR3 具有蜕皮调节转录因子超家族的典型特征，包括两个锌指结构和一个 DNA 结合结构域，不存在信号肽序列和 N 糖基化位点。选择 HaHR3 基因的部分片段构建了 RNAi 中间载体 pRNAi1017-HaHR3sa，再将 HaHR3 正反向序列亚克隆至植物表达载体 pCAMBIA2300-35S-OCS，成功构建了由 35s 启动子调控的 HaHR3 基因的正反向 RNA 干扰载体 pCAM-RNAi-HaHR3。这一载体的成功构建为下一步通过植物介导的 RNA 干扰技术防治棉铃虫打下了坚实的基础。
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