棉 花 学 报        Cotton Science      2009，21(6)：520-523

陆地棉 GAI 基因原核表达与多克隆抗体制备
郑银英^1，2，3，崔百明^2，3，祝建波³，廖文斌²，张根发⁴，彭  明^1，2，3*
(1. 海南大学，海口 570228；2.中国热带农业科学院热带生物技术研究所，海口 571101；3.石河子大学生命科学学院，农业生物技术重点实验室，石河子 832003；4.北京师范大学生命科学学院，北京 100875)

摘要：DELLA 蛋白是 GA 信号响应的关键负调节因子，本文采用基于 EST 的电子克隆方法，从棉花中克隆了 DELLA 蛋白家族的一个成员 GhGAI 。根据电子克隆序列，从陆地棉花胚珠 cDNA 中扩增得到 GhGAI 全长基因片段。将其在原核中表达，得到了分子量（Mr）为 62000 的蛋白质条带。表达蛋白经 His-Tag 亲和层析纯化后，对兔子进行免疫，制备的抗血清通过间接 ELISA 检测，具有较高的效价和特异性。
关键词：陆地棉；GhGAI 基因；多克隆抗体；蛋白质印迹检测
中图分类号：S562.035﹕Q785         文献标识码：A
文章编号：1002-7807(2009)06-0520-04       [全文，1952KB]