棉 花 学 报     Cotton Science   2009,21(6):474-479

 

 

 

斜纹夜蛾取食诱导棉花抑制性消减文库的初步构建及生物信息学分析
许  冬,张永军*,曹广春,陈  洋,吴孔明,郭予元
(中国农业科学院植物保护研究所 / 植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100193)

摘要:为了筛选棉花抗逆基因,实验室构建了棉花被斜纹夜蛾幼虫取食诱导的正、反向抑制性消减文库。文库随机各挑取 1000 个克隆进行 PCR 鉴定,发现插入片段长度主要集中在 200-1000 bp 之间。经反向 Northern 杂交筛选,正向文库随机挑取 250 个克隆测序,得到了 35 条非重复序列 ESTs,反向挑取 150 个克隆,得到 24 条 ESTs。GenBank 数据库 BLAST 序列相似性比对功能分析表明,斜纹夜蛾幼虫取食胁迫棉花的应答过程涉及信号传导、基因调控、抗胁迫、防御反应、能量合成代谢、细胞生长延伸等多个生物途径。诱导表达的基因对斜纹夜蛾取食胁迫功能表现为一定的直接或间接保护作用。
关键词:抑制性消减杂交;表达序列标签;棉花;斜纹夜蛾
中图分类号:S562.035       文献标识码:A
文章编号:1002-7807(2009)06-0474-06      [全文,4189KB]