棉 花 学 报      Cotton Science       2009,21(5):346-350

 

 

 

一个棉花黄萎病抗菌肽基因 25a2 的克隆与表达
张冬冬, 王世英, 郭晓军, 姜军坡, 刘慧娟, 朱宝成 *
(河北农业大学生命科学学院,保定 071001)

摘要:将棉花黄萎病抗菌肽 A2 的 N 端 15 个氨基酸序列在 NCBI 进行同源序列比较,根据同源蛋白的 DNA 序列设计引物,以解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) RS-25 菌株基因组为模板,应用 PCR 扩增出一条约 300 bp 的 DNA 片段。序列分析表明,DNA 片段长 354 bp,编码 117 个氨基酸,将该基因命名为 25a 2。构建表达载体 pET -28a-25a2,转化大肠杆菌(Eschrichia coli)BL21,37℃ 培养,应用终浓度为 1 mmol·L-1的 IPTG 诱导,表达产物经 SDS-PAGE 分析,得到分子量约 15 kDa 表达蛋白条带,与理论蛋白分子量相符。
关键词:棉花黄萎病;解淀粉芽孢杆菌;抗菌肽 A2
中图分类号:S435.621          文献标识码:A
文章编号:1002-7807(2009)05-0346-05      [全文,3811KB]