棉 花 学 报    Cotton Science   2009,21(4):259-264

 

 

 

陆地棉 EPSPS 基因的克隆及其组织 特异性表达分析
童旭宏,吴玉香,祝水金  *
(浙江大学农业与生物技术学院农学系,杭州 310029)

摘要:5-烯醇式丙酮莽草酸 -3- 磷酸合成酶(EPSPS)是莽草酸途径中的一个重要酶,它是非选择性除草剂草甘膦的靶标酶,在高等植物中定位于叶绿体质膜上。根据 EST 拼接的序列设计引物,从陆地棉品种珂字棉 312 中获得了全长为 1834 bp 的 cDNA 序列,其最大可读框为 1565 bp ,编码 521 个氨基酸。陆地棉 EPSPS 基因与其它植物中同类酶在氨基酸水平上有广泛的同源性。通过与已知的其它高等植物叶绿体转运肽剪切位点比对,推断棉花 EPSPS 基因含有 74 个氨基酸叶绿体运输肽和 447 个氨基酸组成的熟蛋白。该酶具有保守的 PEP 结合位点及催化位点的特征序列。半定量分析表明,该基因产物广泛存在于棉花根、茎和叶等各组织中,在叶片中表达量较高。进一步扩增棉花核基因组获得了 3344 bp 的 DNA 序列,它包含 8 个内含子和 7 个外显子。棉花 EPSPS 基因的克隆为抗草甘膦棉花种质资源的创制提供了理论基础。
关键词:陆地棉;EPSPS;草甘膦;表达序列标签
中图分类号:S562.035.3          文献标识码:A
文章编号:1002-7807(2009)04-0259-06       [全文,3165KB]