棉 花 学 报 Cotton Science 2009,21(4):259-264
陆地棉 EPSPS 基因的克隆及其组织 特异性表达分析 摘要:5-烯醇式丙酮莽草酸 -3- 磷酸合成酶(EPSPS)是莽草酸途径中的一个重要酶,它是非选择性除草剂草甘膦的靶标酶,在高等植物中定位于叶绿体质膜上。根据 EST 拼接的序列设计引物,从陆地棉品种珂字棉 312 中获得了全长为 1834 bp 的 cDNA 序列,其最大可读框为 1565 bp ,编码 521 个氨基酸。陆地棉 EPSPS 基因与其它植物中同类酶在氨基酸水平上有广泛的同源性。通过与已知的其它高等植物叶绿体转运肽剪切位点比对,推断棉花 EPSPS 基因含有 74 个氨基酸叶绿体运输肽和 447 个氨基酸组成的熟蛋白。该酶具有保守的 PEP 结合位点及催化位点的特征序列。半定量分析表明,该基因产物广泛存在于棉花根、茎和叶等各组织中,在叶片中表达量较高。进一步扩增棉花核基因组获得了 3344 bp 的 DNA 序列,它包含 8 个内含子和 7 个外显子。棉花 EPSPS 基因的克隆为抗草甘膦棉花种质资源的创制提供了理论基础。
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