棉 花 学 报      Cotton Science    2009，21(3)：236－242

棉花纤维素合酶基因 GhcelA1 克隆及其载体构建
范小平^1，2，范博红²，徐子勤^1*，杨维才^3*
(1.西北大学生命科学学院，西安 710069；2.山西省农科院棉花研究所，运城 044000；3.中国科学院遗传与发育生物学研究所，北京 100101)

摘要：根据 GeneBank 中 GhcelA1（U58283）序列，利用 RT-PCR 技术，从棉纤维中克隆到 GhcelA 1 cDNA 全长。运用基因重组技术，构建 pCAM2300-35S- GhcelA 1 过表达载体；融合基因表达载体 pCAM2300-35S- GhcelA 1-EGFP ，以及 pCAM2300-35S- GhcelA 1-RNAi 载体，这些载体均通过限制性酶切鉴定和测序验证。农杆菌介导法将融合基因转化棉花子叶，通过激光共聚焦荧光显微镜，在蓝色激发光下观察诱导的愈伤，发现在转化的活体细胞核与质膜内侧有绿色荧光，说明融合基因载体 EGFP 构建正确，可以在棉花中正常表达。所构建的系列载体可用于转化棉花，促进纤维素在棉纤维中合成与积累。
关键词：棉花；纤维素合酶；基因克隆；载体构建
中图分类号：S562.035.3        文献标识码：A
文章编号：1002-7807(2009)03-0236-07      [全文，6003KB]