棉 花 学 报 Cotton Science 2009,21(3):190-195
棉花纤维特异表达 GhCesA 4 启动子的克隆及序列分析 摘要:以新疆陆地棉品种新陆早 19 的 DNA 为模板,克隆了棉花纤维特异启动子 GhCesA 4,GenBank 登录号:EU183119,将启动子基因序列克隆到 pMD19-T 载体中,由载体通用引物 M13-47、RV-M 经 PCR 鉴定获得 pMD 19-T/ GhCes A4 重组载体。测序和序列分析表明,该启动子序列由 1503 bp 核苷酸组成,与 GenBank 中 GhCesA 4 基因启动子序列同源性高达 98 %。分别用限制性内切酶 ClaⅠ和 Bam HⅠ双酶切重组质粒 pMD 19-T/ GhCes A4 和双元植物表达载体 pBI 121 ,分别回收 pMD 19-T/GhCesA4 重组质粒中的 GhCes A4 小片段和 pBI 121 植物表达载体中缺失 CaMV35S 组成型启动子的大片段,经连接、转化、酶切及测序鉴定,获得由 GhCesA 4 驱动报告基因 GUS 的新型植物表达载体,命名为pBI-GhCesA 4。
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