棉 花 学 报    Cotton Science    2009，21(2)：89-93

来源于耐旱荒漠植物蛋白 CkND 对棉花黄萎病
的抑制作用及其抗旱性研究
李付广^1*，侯玉霞^2*，方    鑫²，龚玉梅², 张雪妍¹
（1.中国农业科学院棉花研究所棉花遗传改良重点开放试验室, 河南安阳 455000；
2.中国农业大学理学院，北京 100193）

摘要：利用蛋白组学策略分离了荒漠植物-牛心朴子（Cynanchum komarovii）抗病、抗旱功能相关蛋白 CkND 。以棉花黄萎病菌为供试菌株，研究了蛋白 CkND 对棉花黄萎病的抑制作用。结果表明：蛋白 CkND 对棉花黄萎病菌菌丝生长及孢子萌发具有较好的抑制作用。离体试验中，100 mg·L^-1 的蛋白 CkND 对棉花黄萎病菌菌丝生长抑制效果在 24 h、48 h、72 h 分别为 79.53%、83.01%、87.50％，35 mg·L^-1 的蛋白 CkND 对孢子萌发抑制率为 100%；活体试验中，蛋白 CkND 对棉花黄萎病具有显著的防治效果。另外，本研究将 CkND 基因构建到 pCAMBIA1304 表达载体 CaMV35S 启动子下游，将 pCAMBIA1304-CkND 通过农杆菌介导转化法转入野生型拟南芥植株中。将 33 个株系的转 pCAMBIA1304-CkND 的 T₂ 代拟南芥和 21 株转 pCAMBIA1304 的 T₂ 代拟南芥，同时进行抗旱性试验。结果显示，转 pCAMBIA1304 的 T₂ 代拟南芥 14 个株系枯死，而转 pCAMBIA1304-CkND 的 T₂ 代拟南芥有 24 个株系的转基因植株存活，且叶片保持绿色，植株生长良好，根系、须根发达，须根数目明显增多。转 pCAMBIA1304- CkND 拟南芥株高增加了30%，显著提高了植物抗旱性。
关键词：牛心朴子；蛋白 CkND；棉花黄萎病；抗旱性
中图分类号：S435.621          文献标识码：A
文章编号：1002-7807(2009)02-0089-05       [全文，2887KB]