棉 花 学 报 Cotton Science 2008,20(2):88-93
两个棉花几丁质酶基因的克隆与表达分析 摘要：从棉花黄萎病缩减杂交库中得到了分属Ⅲ型和Ⅳ型几丁质酶的两个片段，它们都具有完整的 3 '末端。通过 RACE 与 RT-PCR 结合获得了这 2 个基因完整的读码框序列。其中Ⅳ型几丁质酶的开放读码框为 678bp ，编码长为 226 个氨基酸的蛋白，命名为 Ghach 4 ；Ⅲ型几丁质酶的全长为 1390 bp ，编码长为 298 个氨基酸的蛋白，命名为 Ghachi 3 。它们与拟南芥同源基因的相似性分别达到 65% 和 71% 。利用网上分析软件发现这 2 个基因都有信号肽序列，并预测编码的蛋白位于胞质体外。半定量 RT-PCR 发现 Ghachi 3 在花、蕾和韧皮部中的表达量较高，而 Ghachi 4 在韧皮部表达量最高。 Ghachi 4 仅在抗病品种受黄萎病和枯萎病的诱导后表达上调，而 Ghachi 3 还在感病品种中受黄萎病的诱导表达。同时，在常抗棉中 2 个基因的表达都受到 ABA 的强烈诱导。推测这 2 个基因可能参与生物胁迫或非生物胁迫的防御反应。
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