棉 花 学 报     Cotton Science   2008，20(1)：9-13

多位点整合的转基因棉花后代分子鉴定
马小波^1，2，王芙蓉¹，张传云¹，刘国栋¹，高俊平^1，2，张  军^1*
(1.国家棉花遗传改良中心山东分中心，山东棉花研究中心，济南 250100；2.山东师范大学，济南 250014)

摘要：GFP47是一个利用双元载体 pPZP111 构建的绿色荧光蛋白基因的简单质粒载体 pPZP-GFP 经农杆菌介导转化陆地棉 ( Gossypium hirsutum L.) 获得的 T₀ 株系，PCR和Southern杂交分析证实其不仅整合了多个拷贝的正常的 T-DNA ，而且有紧邻 T-DNA 左边界的载体骨架序列的整合。对来源于 GFP47 的 33 个 T₁个体的 PCR 分析表明，T₁后代中可以分离只有正常 T-DNA 整合的个体。对 T₁ 群体中不同基因型个体的 Southern 杂交分析结果显示，该多拷贝整合的 T₀ 转化体至少在棉花基因组中有四个插入位点，不同的 Southern 带型暗示不同插入位点的 T-DNA 结构和排布有很大的不同。至少有一个位点整合了只包括目的基因和选择标记基因在内的正常 T-DNA 结构。
关键词：转基因棉花；多位点整合；T-DNA；载体骨架；PCR；Southern 杂交分析。
中图分类号：S562.035.03        文献标识码：A
文章编号：1002-7807（2008）01-0009-05       [全文，2559KB]