棉 花 学 报 Cotton Science 2008，20(1)：3-8
黄萎病菌诱导下陆地棉抗病品种 SSH 文库的构建 摘要：采用抑制差减杂交技术，构建了陆地棉抗病品种冀棉 20 经黄萎病菌诱导8h、12h、24h、48h后的混合 SSH 文库，文库共包含 800 个阳性克隆。对质粒的酶切和巢式 PCR 结果表明，插入片段大小平均为 400 bp 。随机挑选 20 个阳性克隆进行测序，利用 BLASTn 和 BLASTx 进行序列相似性分析，发现 20 条 EST 都可以找到功能已知的同源序列，其中在 BLASTn 比较结果中，功能已知的有 12 条，占全部 EST 的 60%；BLASTx 的比较结果中有 14 条功能已知，占全部 EST 的 70%。这些同源序列涉及到 10 种与抗病防御相关的基因，包括丝氨酸/苏氨酸激酶、谷胱甘肽 -S- 转移酶、乙醇脱氢酶、细胞色素 P450、ACC 氧化酶等。将这些序列与 GenBank dbEST 库进行比对，发现75%的 EST 都可以找到同源性较高的序列，它们都来自于植物在生物与非生物胁迫条件下特异表达的 cDNA 文库，这些胁迫包括病原菌诱导、低温处理、紫外线照射、热激处理、盐处理、氧胁迫、水杨酸诱导等。
|