棉 花 学 报 Cotton Science 2007,19(6):419-423
基因枪转化法在棉纤维细胞中瞬时表达外源基因的研究 摘要:试验运用了0 d,1 d 的棉胚珠为受体,GUS 基因为报告基因,用基因枪直接对胚珠表皮细胞进行轰击。整个表达载体包括两个部分,第一部分是由 CaMV35S 调控的 GUS 基因,第二部分是由棉纤维特异表达启动子(RDL1)调控的目标基因,因此目标基因与 GUS 报告基因能在同一个单纤维细胞中同时表达,从而提供了一个直观的在单纤维细胞中验证目标基因的表达与纤维发育关系的方法。研究中对受体棉花胚珠的发育时间、基因枪的轰击压力、轰击距离及轰击次数等影响转化效率的因素进行了分析优化。结果表明,最佳的转化组合条件是:以开花一天的棉花胚珠为受体,当轰击压力为 1100psi,轰击距离为 9㎝,轰击次数为 2 次时可达到最高的转化率,并能观察到稳定的 GUS 表达。
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