棉 花 学 报 Cotton Science 2007,19(2):134-138
含NPTⅡ标记基因的转基因抗虫棉室内快速鉴定方法 摘要:通过试验研究,提出了种室内快速筛选和鉴定含NPTⅡ标记基因的转基因抗虫棉的方法。一是待检测棉子去种皮,在含卡那霉素培养基培养,根据幼苗子叶颜色和棉苗状态来辨别是否是转基因材料,卡那霉素最适浓度为0.75g·L-1;二是去皮种子培养在无卡那霉素的萌苗培养基上,在棉苗子叶上涂抹卡那霉素溶液进行鉴定,最适浓度为4.0g·L-1;三是在待测棉苗子叶上打孔、滴加一定浓度的卡那霉素,根据打孔并滴加卡那霉素部位的叶片颜色变化,鉴别并统计转基因植株,其最适浓度为2.0g·L-1。3 种方法均可在卡那霉素处理后4-7d内快速鉴定出转基因植株。同时,对转基因阳性植株进行PCR鉴定,结果表明 3 种卡那霉素方法鉴定的准确率均在 90% 以上。
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