棉 花 学 报 Cotton Science 2006，18(2)：67-73
一个新的棉纤维表达蛋白 cDNA 的克隆、表达
及功能初步分析
郭 媖，郭旺珍*，张天真
（南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室， 南京 210095）
摘要：通过陆地棉高品质纤维种质系 7235 的棉纤维混合 cDNA 文库随机测序，得到一个开放阅读框（open reading frame， ORF）完整的棉纤维表达蛋白（GhCFE，GenBank 登录号：DQ073045）cDNA 序列。该 cDNA 序列全长 1274bp，最大的 ORF 为 996bp，编码 332 个氨基酸，其理论上的等电点 pI＝6.14，分子量 Mw＝37.7KD。它的 N-末端存在一个长度为27个氨基酸残基的信号肽。 RT-PCR分析表明，该基因在根、茎中不表达，在叶片中微弱表达，在不同发育时期的纤维细胞中均表达，且在纤维伸长期表达量最高。进化树显示 GhCFE 与已报导的3个棉纤维表达蛋白 cDNA 有很高的同源性。通过构建酵母表达载体，发现该基因对酵母细胞的伸长和细胞壁加厚没有显著影响。利用 pBI121 质粒构建了含 35S 启动子的正义表达载体和含棉纤维特异表达启动子 E6 的正义和反义表达载体，正在通过农杆菌介导的遗传转化，开展该基因的功能验证。
关键词：棉花；纤维表达蛋白；表达载体
中图分类号：S562.035.03 文献标识码：A
文章编号：1002-7807（2006）02-0067-07 [全文，3007KB]
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