棉 花 学 报   Cotton Science  2005，17(6)：334-338

高品质转野生荠菜凝集素基因棉花的获得
肖松华¹，吴巧娟¹，刘剑光¹，狄佳春¹，许乃银¹，陈旭升¹，柏立新²
（1.江苏省农业科学院经济作物研究所，南京 210014；2.江苏省农业科学院植物保护研究所）

摘要：利用花粉管通道转基因技术，将DE35S启动子驱动的野生荠菜凝集素（WSA）基因导入10个高品质棉花品种（系）。所使用的转基因表达载体还含有选择标记基因 NPT Ⅱ（卡那霉素抗性基因）和Ω序列，以利于转基因植株的筛选以及WSA基因的高效表达。对转化当代3197棵棉苗的检测结果表明，4.88%植株具有卡那霉素抗性（Kan⁺）。根据野生荠菜凝集素基因序列设计一对特异性引物，对156个Kan⁺植株进行PCR检测，筛选出45个转WSA基因棉花工程植株。45个株系纤维品质测定结果表明，获得了9个高品质转WSA基因棉花株系。并对植物基因工程研究中以 NPT Ⅱ作为标记基因的局限性以及一些转WSA基因棉花株系纤维强度变劣的原因进行了探讨。
关键词：棉花；基因工程；野生荠菜凝集素基因；纤维品质
中图分类号：S562.035.3     文献标识码：A
文章编号：1002-7807(2005)06-0334-05      [Full Text, 4574KB]

参考文献：
［1］梁  峰，常团结．植物凝集素的研究进展［J］．武汉大学学报，2002，48（2）：232-238．
［2］周兆斓，朱  祯. 植物抗虫基因工程研究进展［J］．生物工程进展，1994，14（4）：18-24．
［3］王志斌，李学勇，郭三堆．植物凝集素与抗虫基因工程［J］．生物技术通报，1998，2：5-10．
［4］路子显，常团结，朱  祯. 植物外源凝集素及其在植物基因工程中的应用［J］．生物工程进展，2002，22（2)：3-9．
［5］孟  玲，王利萍，何  微，等．转基因抗虫棉的初选和抗虫鉴定（Ⅱ）［J］．新疆农业大学学报，2000，23（4）：52-55．
［6］肖松华，刘剑光，黄骏麒，等．转基因抗蚜虫棉花新种质的培育［J］．中国棉花，2001，28（3）：19-20．
［7］王冬梅，孙  严，孟庆玉，等．新疆抗棉铃虫、蚜虫转基因棉花的初步筛选［J］．新疆农业科学，2001，38（3）：153-154．
［8］刘  志，郭旺珍，朱协飞，等．转Bt＋GNA双价基因抗虫棉花中抗虫基因及其抗虫性的遗传稳定性［J］．作物学报，2004，30（1）：6-10．
［9］肖松华，刘剑光，吴巧娟，等．转外源凝集素基因棉花对棉蚜的抗性鉴定［J］．棉花学报，2005，17（2）：72-78．
［10］PATERSON A H， Brubaker C L， Wendel J F. A rapid method for extraction of cotton (Gossypium spp.) genomic DNA suitable for RFLP and PCR analysis［J］. Plant Mol Biol Rep，1993，11：122-127．
［11］张震林，刘正銮，周宝良，等．转兔角蛋白基因改良棉纤维品质研究［J］．棉花学报，2004，16（2）：72-76．