棉 花 学 报  Cotton Science  2005,17(1):12-17

 

棉花胚性细胞悬浮系的建立及其影响因素分析
夏启中,张献龙*,聂以春,郭小平
(华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室,湖北武汉 430070)

摘要:对棉花悬浮细胞系建立过程中激素的配比和浓度、培养基成分、悬浮细胞的生长过程及衰老过程中 PCD的发生系统研究结果表明:MS+2,4-D 0.5 mg·L-1+KT 0.1 mg·L-1和MS+2,4-D 0.1 mg·L-1+KT 0.1 mg·L-1培养基有利于细胞分裂,能产生体积较大,均匀一致,细胞活力强的单细胞和小细胞团,适合于进行细胞生长调控等研究。而MS+IBA 0.5 mg·L-1+KT 0.1 mg·L-1和MS+IBA 0.1 mg·L-1+KT 0.1 mg·L-1培养基则有利于形成大的细胞团和不同时期的胚状体,适合于进行胚状体的发育研究。钾盐、肌醇有利于细胞的分裂增殖,且能抑制胚状体的发生。可通过增加钾盐(K+)、肌醇含量来调节细胞的生长状态和细胞活性,以建成分裂增殖快、细胞活性强的悬浮细胞系。在悬浮培养过程中,管状细胞渐渐消失,被球状的单细胞和小细胞团所替代。棉花胚性愈伤悬浮细胞的生长曲线呈S形,在起始培养的0~3 d是生长的延迟期;在第3~15天是指数增长期;到第15天以后,生长速度降低,是静止期。悬浮培养的棉花细胞必须在15 d以前进行继代,以保持其旺盛的分裂能力和细胞活性。
关键词:悬浮细胞系;棉花;影响因素;生长曲线
中图分类号:S562.035     文献标识码:A
文章编号:1002-7807(2005)01-0012-06    [全文,2536KB]

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