%0 Journal Article %A 王俊娟 %A 陆许可 %A 阴祖军 %A 王德龙 %A 王帅 %A 穆敏 %A 陈修贵 %A 郭丽雪 %A 樊伟丽 %A 陈超 %A 叶武威 %T 陆地棉GhLEA3基因的克隆及其响应低温胁迫表达分析 %D 2019 %R 10.11963/1002-7807.wjjyww.20190311 %J 棉花学报 %P 89-100 %V 31 %N 2 %X

【目的】本研究旨在探索棉花GhLEA3基因的结构特征及其在低温胁迫下的表达模式,研究其抗逆功能。【方法】利用同源序列克隆法在陆地棉中克隆GhLEA3;采用生物信息学方法分析其蛋白质性质,构建系统进化树。采用In-Fusion连接技术构建融合蛋白表达载体35S∷GhLEA3-GFP并进行亚细胞定位;在棉花三叶期进行叶片低温表达分析;采用农杆菌介导的花序浸染法将GhLEA3基因转入拟南芥;对T3转基因拟南芥种子进行4 ℃低温萌发试验;低温处理后测转基因拟南芥叶片的电导率。【结果】GhLEA3基因编码序列全长1 218 bp,编码405个氨基酸;GhLEA3蛋白含有4个功能结构域PF02987。陆地棉GhLEA3与拟南芥AtLEA3氨基酸序列之间相似性为52.6%。GhLEA3蛋白可能定位在液泡和小泡中。GhLEA3基因在低温处理的棉花叶片中上调表达。T3转基因拟南芥低温萌发率显著高于野生型,低温处理后转基因拟南芥叶片电导率显著低于野生型。【结论】陆地棉GhLEA3属于典型的LEA3家族成员,与拟南芥AtLEA3亲缘关系最近;该基因响应低温胁迫,可能在抗冷中起重要作用。

%U https://journal.cricaas.com.cn/Jweb_mhxb/CN/10.11963/1002-7807.wjjyww.20190311